EvaGreen® 是一種(zhǒng)用于實時(shí)定量 PCR （ qPCR ）的 DNA 結合染料。該染料的諸多優點使它遠勝于 SYBR Green I 。除了有相似的光譜特性， EvaGreen® 有三個主要特點使它區别于 SYBR Green I 。

首先， EvaGreen® 對(duì) PCR 的抑制性遠小于 SYBR Green I 。因此，使用 EvaGreen® 進(jìn)行的 qPCR 實驗可以使用快速 PCR 步驟。同時(shí)， EvaGreen 在實驗中可以使用較高的濃度，從而獲得遠強于 SYBR Green I 擴增信号（圖 1）。較高濃度的 EvaGreen 也消除了“染料重分布”的缺陷，使 EvaGreen 既可用于多重 PCR ，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲線分析（ HRM ）（圖 4 ）。該分析正被(bèi)越來越多的用于 PCR 後(hòu)的基因分型和異源雙鏈分析 。由于 SYBR Green I 對(duì) PCR 的抑制性，從而要求其使用濃度必須很低，因此 SYBR Green I 無法解決由低濃度造成(chéng)的染料重分布問題，既不能(néng)用于多重 PCR 也不能(néng)用于 HRM 。同時(shí)，染料重分布問題也可能(néng)影響常規熔解曲線的可靠性，因爲低熔點的 DNA 鏈可能(néng)由于這(zhè)種(zhǒng)原因而無法檢測到 。

第二， EvaGreen 的穩定性極強。在正常的儲存、操作和 PCR 過(guò)程中不會(huì)被(bèi)破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱裡(lǐ)，也可以反複凍融。與之相反， SYBR Green I 不穩定而且降解後(hòu)對(duì) PCR 抑制性更強 。

EvaGreen 降低了細胞膜透性，因而比 SYBR Green 1 更加安全（圖 6 ）。獨立實驗室的測試結果顯示， EvaGreen 既沒(méi)有誘變性也沒(méi)有細胞毒性 。相反，雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱，但它在細胞中可能(néng)抑制了正常 DNA 的修複機制，使其有誘變增強作用 。考慮到 PCR 的廣泛使用，其安全性應該足夠重視。

除 EvaGreen 20 × (#31000) 可稀釋 20 倍後(hòu)用于 qPCR 外，BIOTIUM 公司還(hái)提供多種(zhǒng)結合 Cheetah Taq（Biotium公司的一種(zhǒng)新型化學(xué)修飾的熱啓動 DNA 聚合酶）的 Fast EvaGreen Msater Mix 。